Реферат: Введение. При беременности особую роль играют NK-клетки, поскольку они находятся в тесном контакте с клетками трофобласта. Один из способов взаимодействия этих клеток основан на связывании цитотоксического рецептора NK-клеток NKG2D с молекулами MIC на мембране трофобласта. Поскольку клетки трофобласта имеют аллогенную природу, они избегают цитотоксичности NK-клеток, высвобождая растворимые формы молекул MIC. Поскольку для успешного исхода беременности необходим баланс между иммунными клетками матери и клетками плода, следует оценить роль молекул MIC во взаимодействии трофобласта и NK-клеток. Цель. Изучить влияние белков MIC на изменение фенотипа клеток линий NK-92 и Jeg-3 при моно- и сокультивировании. Материалы и методы. Оценивали изменение фенотипа клеток под влиянием IL-12, рекомбинантных белков MIC (rMIC) и моноклональных антител к MIC (МКАТ). Клетки линии Jeg-3 обрабатывали раствором CFSE, после чего инкубировали 20 минут с rMIC или МКАТ в 96-луночном планшете. В половину лунок вносили клетки линии NK-92, часть из которых была предварительно активирована IL-12 в течение 24 часов. В планшет также вносили активированные и контрольные клетки линии NK-92, которые обрабатывали rMIC или МКАТ. Планшет инкубировали 24 часа, после чего проводили оценку фенотипа с помощью проточного цитофлуориметра FacsCantoII, используя антитела с флуоресцентными метками к молекулам NKG2D, MICA, MICB. Результаты. Инкубация NK-клеток с клетками трофобласта привела к увеличению экспрессии ими рецептора NKG2D и снижению экспрессии MICA. Обработка NK-клеток rMIC или МКАТ не приводила к изменению их фенотипа. Активация NK-клеток IL-12 приводила к снижению экспрессии ими рецептора NKG2D. Инкубация активированных клеток в присутствии rMIC или МКАТ отменяла эффект IL-12. Обработка сокультуры интактных или активированных IL-12 NK-клеток и клеток трофобласта rMIC или МКАТ не влияла на фенотип NK-клеток. Внесение rMIC или МКАТ не влияло на фенотип трофобласта при монокультивировании. Совместная инкубация трофобласта с NK-клетками приводила к снижению экспрессии трофобластом молекулы MICA. При сокультивировании клеток трофобласта с NK-клетками в присутствии rMIC или МКАТ снижалось количество клеток трофобласта, экспрессирующих MICA, по сравнению с монокультивированием, но не изменялось относительно базового уровня при сокультивировании. Количество клеток трофобласта, экспрессирующих молекулы MICB, снижалось в присутствии NK-клеток и rMIC или МКАТ относительно уровня при монокультивировании. Выводы. Сокультивирование NK-клеток с клетками трофобласта способствует активации NK-клеток. Сокультивирование клеток трофобласта с NK-клетками вызывает снижение уровня экспрессии MICA трофобластом, что может свидетельствовать о реализации трофобластом механизмов защиты от цитотоксичности NK-клеток. Активация NK-клеток IL-12 вызывала снижение экспрессии клетками NKG2D, а значит снижение способности к рецепции молекул MIC. Внесение rMIC и МКАТ отменяли эффект IL-12, поскольку уровень экспрессии NKG2D возвращался к контрольному. Таким образом, молекулы MIC участвуют в процессе взаимодействия трофобласта и NK-клеток, а внесение моноклональных антител к MIC или рекомбинантных белков MIC позволяет регулировать экспрессию NK-клетками рецептора к MIC NKG2D. Поддержано грантом РНФ № 24-15-00002

Библиографическая ссылка: Денисова Е.А. , Тыщук Е.В.
ВЛИЯНИЕ МОЛЕКУЛ MICA И MICB НА ФЕНОТИП ЕСТЕСТВЕННЫХ КИЛЛЕРОВ И КЛЕТОК ЛИНИИ
XXXI Всероссийская конференция молодых учёных с международным участием «Актуальные проблемы биомедицины – 2025» 20-21 мар. 2025